Microorganismo de agua dulce

TEMA14:composición de los medios de cultivo



1)carbono y nitrógeno

Son utilizados como fuentes energéticas y plásticas.

2)sales minerales

Elementos como el azufre,fósforo,hierro,calcio y magnesio k mantienen el equilibrio ácido-base y la presión osmótica.

3)factores de crecimiento

Compuestos k el microorganismo es incapaz de sintetizar por sí mismo.

4)factores de arranque

Sustancias k se requieren para k comience el desarrollo de los microorganismos,tales como la sangre o los higratos de carbono

.5)agua:

ya k es el medio en el k se desarrolla la actividad de los microorganismos,suponiendo por ejemplo entre un 80%-90% del peso celular bacteriano.

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La composición básica de un microorganismo la constituye el agua y un compuesto mineral k aporte todos los nutrientes k puedan necesitar cualquier microorganismo

.En la composición de los medios de cultivo podemos encontrar


Fuentes de carbono

Corresponde a azucares como la glucosa,lactosa y almidón.

Fuentes de nitrógeno

Como los nitratos o fuentes proteicas orgánicas como las peptonas.

Extractos de carne

Tienen una composición poco definida y son fuente de proteínas,nitrógeno e hidratos.

Extractos de levadura

Preparados hidrosolubles y fuente de nitrógeno.

Sales minerales:

como el azufre,hiero,fósforo,cálcio y magnesio

.Indicadores de PH

Hay medios k contienen indicadores como el púrpura de bromocresol,k se utilizan para poner de manifiesto el metabolísmo bacteriano con la producción de ácido.Si hay fermentación el medio cambia de color

.Agentes reductores

Se añaden a los medios de cultivo para favorecer el crecimiento en anaerobiosis.Agentes selectivos:impiden el crecimiento de un tipo de microorganismo y permiten el crecimiento de otros.Se utilizan en los medios selectivos entre los k destacan

:a)colorantes

Como el verde brillante o el azul de metileno k inhiben el crecimiento de las bacterias gram positivas.

B)antibióticos

Se añaden tras esterilizar el medio.El antibiótico actúa contra las bacterias y permite el crecimiento de hongos.

C)cloruro sódico

A elevada concentración en un medio de cultivo inhibe el crecimiento de la maoría de los microorganismos pero existen otros como los estafilococos k toleran dicha concentración.

D)ph

La mayoría de los microorganismos crecen a un ph bajo o alto, se obtendrá un cultivo selectivo de los microorganismos k toleren ph extremos.

Solidificantes:

como el agar k da consistencia.

Agua

Es el componente mayoritario e imprescindible.

Clasificación de los medios de cultivos:A)según su composición:medios sintéticos:

compuestos por nutrientes e ingredientes químicamente bien definidos.Son los mas empleados


Medios complejos

Su composición química no esta bien definida.Utilizan ingredientes como extractos de carne,levadura o clara de huevo.

Medios sintéticos


Contienen ingredientes bien definidos químicamente a los k se añaden otros ingredientes bien definidos


B)según su consistencia


Medios sólidos

Es su composición está incluido el agar en solución acuosa,k varía según la mayor o menos consistencia k se le quiera dar.

Medios semisólidos

La proporción de agar es inferior al 1%.Se utilizan para el estudio de la movilidad de microorganismos.

Medios líquidos

No llevan agar por lo k son sólidos,son llamados caldos.

C)según su finalidad


Medios ordinarios

Son de uso general ya k crecen la mayoría de microorganismos.

Medios enrriquecidos

Se le añaden productos como la yema d huevo o la sangre k permiten el desarrollo de los microorganismos mas exigentes.Ej:agar sangre o agar chocolate

.Medios diferenciales

Ponen de manifiesto ciertas propiedades k poseen algunos grupos bacterianos.Ej:los microorganismos fermentadores de lactosa ponen de manifiesto la utilización de ésta con la producción de gas.

Medios selectivos

Permiten el desarrollo de un determinado grupo de microorganismos e impiden el desarrollo de otros ya k contiene los nutrientes necesarios para k unos se desarrollen y otros se inhiban.Se consigue añadiendo antibióticos k inhiben el crecimiento de bacterias gram positivas.

Medios de enrriquecimiento selectivo

Favorecen el crecimiento de bacterias en pequeña proporción frente a la totalidad de las bacterias presentes.Ej,el caldo de selenito k se utiliza en el enrriquecimiento de Salmonella.

Medios de identificación

Ponen de manifiesto las propiedades bioquímicas de una bacteria.Se siembran con bacterias aisladas.

Técnicas de incubación:

tras la inoculación de una muestra en un medio de cultivo es preciso mantener unas condiciones óptimas para garantizar el desarrollo.Las condiciones son:
una temperatura adecuada favorece el desarrollo del microorganismo,cuando esta no es la adecuada se obtiene datos dispares.La temperatura depende del microorganismo siendo frecuente una temperatura óptima de 37ºC ya k es a la k se incuban los microorganismos patógenos para el hombre.Los coliformes fecales a 44ºC y los aerobios mesófilos  a 22ºC.Para mantener la temperatura adecuada se utilizan las estufas de cultivo o incubadoras.La incubación asegura la presencia de oxígeno para condiciones de aerobiosis.Posibilitan una temperatura constante y uniforme admitiendo oscilaciones de temperaturas de 0,5ºC.Las estufas deben tener un control de temperatura o un termómetro testigo que indique la tª en el interior.
El agua y la humedad es esencial para el desarrollo del microorganismos y aunque va incorporada en el medio hay k revisar el espesor de este y la fecha de caducidad.

La disponibilidad de oxígeno


Es importante para los microorganismos ya k unos son aerobiosotros anaerobios estrictos o facultativos.Para el cultivo de aerobios se utilizan las estufas convencionales. En ocasiones es necesario disminuir la concentración de oxigeno y aumentar la de CO2 para favorecer el desarrollo de microorganismos microaerófilos.En estos casos se emplean las estufas de CO2 k mantienen un ambiente entre un 5 y un 10% de CO2.Cuando se trata de cultivar gérmenes anaeróbios estrictos incapaces de desarrollarse en presencia de oxígeno.Para ello se utilizan bolsas de anaerobios, jarras de anaeróbios o cámaras.Son sistemas en los k se crea un medio rico en CO2 k desplaza el oxígeno gracias a una reacción química.Según el volumen de trabajo del laboratorio se empleará un sistema u otro.Las bolsas solo admiten una placa de petri mientras k en las jaras entras unas 10 placas y varios tubos de ensayo.
*Para evitar la presencia de microorganismos ajenos hay k mantener cerrados todos los recipientes y no abrirlos durante todo el tiempo de incubación.*todas las condiciones no sirven de nada si no se respeta el tiempo de incubación.
Para ello es conveniente anotar la fecha y hora a la k comienza la incubación.*con el fin de asegurar la fiabilidad del proceso de incubación es conveniente realizar un control de la temperatura unas dos veces al dia.Estos controles pueden ser positivos o negativos: negativos:al mismo tiempo k se introduce en la estufa el medio inoculado con la muestra ,se deposita otra placa sin inocular para k sirva de testigo y observar un posible crecimiento bacteriano.Si hay crecimiento es consecuencia de k la placa esta contamminada o el propio medio de cultivo

.Positivo

Si se inocula una bacteria tipo identificada se debe obtener un crecimiento positivo tras la incubación.Esta siembra servirá de testigo en el análisis microbiológico como control.
En función de la temperatura de incubación los microorganismos se clasifican en mesófilos(crecen a temperaturas moderadas),termófilos(crecen a temperaturas elevadas)
y psicrófilas(crecen a temperaturas bajas).

Definiciones:cultivo:

es la población de microorganismos k se ha desarrollado en un medio de cultivo.

Cepa

Conjunto de microorganismos pertenecientes a una misma especie k existen en un cultivo.

Sembrar:

significa introducir de modo artificial una mínima parte de una muestra,en un medio de cultivo apropiado con el objeto de averiguar si los microorganismos son capaces de reproducirse.

Inócuo

Porción de la muestra k se pone en contacto con el medio de cultivo.

Resiembra:

alude a la transferencia de una muestra microbiológica desde un medio de cultivo a otro. 

TEMA 15:el microscópio:según la fuente de energía empleada para ampliar la imagen,los microscópíos se pueden clasificar en microscópíos ópticos  y electrónicos.La microscopí óptica se basa en la amplificación de la luz mediante lentes mientras k la electrónica se fundamenta en la amplificación de un haz de electrones k son desviados por campos electromagnéticos.El óptico es el k se utiliza habitualmente.
según las lentes utilizadas hay dos microscopios:

1)simple:

tiene un solo grupo de lentes.También se le llama estereoscópico cuando el grupo óptico se sitúa sobre una columna

.2)compuesto

Tiene dos grupos de lentes,el objetivo y el ocular
.Los objetivos son tubos k contienen en el interior grupos de lentes de pequeño diámetro y distancia focal muy corta para ampliar la imagen.

El ocular:

son dos es la parte a la k se acercan los ojos para observar.El microscópio compuesto de campo luminoso hace referncia al compuesto.El electrónico aporta una resolución muy superior al óptico.
Hay dos tipos de microscópíos electrónicos, el de transmisión y el de barrido.

Tipos de microscopios ópticos

De campo luminoso,de campo oscuro,de contraste de fases,de luz ultravioleta y de fluorescencia:consiste en la combinación de una técnica de tinción y la utilización del microscópio de luz ultravioleta.La fluorescencia es la propiedad de ciertas sustancias de emitir radiación.Los microorganismos teñidos se observan como cuerpos brillantes
.La diferencia entre el de luz ultravioleta y el de fluorescencia es la técnica de observación.En el primero es directa con la k se emplean películas sensibles al espectro UV. El de fluorescencia se emplea en inmunología ya k los antígenos y anticuerpos se marcan con fluorocromos k permiten detectar la reacción antígeno-anticuerpo.

Propiedades ópticas del microscopio

aumento:
Relación entre el tamaño de la imagen observada y la k obtenemos al observarla.El aumento total depende de la capacidad de amplificación del ocular y del objetivo.

Poder de resolución:

capacidad de una lente o grupo para distinguir dos objetos k están muy juntos y separarlos.