Define biología molecular y citogenética.BIOLOGÍA MOLECULAR

Es la parte de la biología que estudia la composición, estructura y función de las moléculas biológicamente importantes, así como los procesos en los que están implicadas.

CITOGENÉTICA

Es la parte de la genética que estudia la estructura, función y el comportamiento de los cromosomas de la metafase.

Termociclador: función y partes

Es el aparato donde se lleva a cabo la PCR y permite realizar secuencialmente un número elevado de ciclos repetitivos programables con temperaturas diferentes y distintos tiempos de incubación y todo esto estará controlado por un microprocesador.

Las partes son:

Bloque incubador: soporte metálico con múltiples pocillos para colocar los tubos de reacción de PCR. El rango de temperatura oscila entre los 4 y los 96º.- Tapa del bloque incubador: es una tapa termoestatizada a 102-105º, una vez cerrada entra en contacto directo con la tapa de los tubos de reacción. Su función principal será que el agua presente en la reacción de la PCR se evapore y se condense en la tapa.

Electroforesis: función y actuación

La electroforesis es un proceso que vamos a utilizar para separar moléculas de distintos tamaños. Esto nos va a permitir analizar los productos amplificados por la PCR o purificar y obtener fragmentos de tamaño concreto de ADN. Se lleva a cabo aplicando un campo eléctrico en una disolución tampón de pH 7,5 – 7,8. La muestra va a migrar con mayor o menor velocidad a través del gel.Junto a la muestra se suelen utilizar algunos tintes en especial el BROMURO DE ETIDIO (este va a producir fluorescencia).

Electroforesis: partes

Para realizar este tipo de técnica necesitamos un equipamiento (partes) que sería el siguiente:- Soporte de plástico o también conocido como cama que es donde solidifica el gel.- Cubeta de electroforesis: esta a su vez se compone de:Un soporte central para la cama del gel.Dos zonas de depósito de tampón de electroforesis en cada uno de los extremos.Dos electrodos: uno positivo y otro negativo. Fuente de alimentación: esta debe suministrar corriente eléctrica continúa a la cubeta y debe permitir seleccionar el voltaje o amperaje para graduar su intensidad.

Documentador de geles: función y equipamiento

Es un equipo que permite visualizar las bandas moleculares de los ácidos nucleicos que aparecen tras el proceso de electroforesis y se obtienen una fotografía de resultados. Este equipo consta de:Transiluminador: consiste en una fuente de luz ultravioleta.Cámara fotográfica o sistema de captación de imágenes.

Laboratorio biología molecular: equipamiento genérico

Cabina de bioseguridad.Sistema de purificación de aguas.Espectrofotómetros.Microscopio de luz transmitida y fluorescencia.Autoclave.Incubador o estufa.Baño termostático.Placa calefactora.Centrífuga.Nevera y congeladores.Otros equipos: balanzas, agitadores magnéticos, pHmetros, conductímetros, utensilios de vidrio,Laboratorio biología molecular: salas.
Debe constar de 4 salas:

Sala de preparación de reactivos

: esta sala debe estar limpia de ADN por lo que sería imprescindible trabajar en una campana de seguridad.

Sala de preparación de muestra y extracción de ADN

: esta sería una sala sucia ya que hay moléculas de ADN y se debe trabajar también en una campana de bioseguridad.

Sala de la PCR

en ella se producirá este proceso y será más difícil que se contamine la muestra. (La muestra está en recipientes tapados y colocados en gradillas donde son transportados a la sala de PCR).

Sala post-PCR

: en ella estarán los equipos de electroforesis y documentación del gel; y se considera también una sala sucia (se abren las muestras para la lectura de la electroforesis y puede haber contaminación de las muestras).

Laboratorio biología molecular: fuentes de contaminación

La fuente de contaminación puede ser muy variada: Cruzada que puede ser material o microorganismos ambientales, contaminantes procedentes del propio personal de laboratorio y contaminantes de la superficie de trabajo. Por productos amplificados que serán generados mediante la PCR en el propio laboratorio.De los reactivos comerciales y del material fungible: hay que pensar que el término estéril es la ausencia de microorganismos pero no garantiza la eliminación total de ADN ni la inactivación de las enzimas.

Técnicas de asepsias: concepto y actividades

Se entiende por asepsia en un laboratorio de biología molecular al conjunto de actividades encaminadas a prevenir la contaminación por microorganismos, ácidos nucleicos y nucleasas.
Buenas prácticas de laboratorio (BPL):Lavado de manos (se debe hacer frecuentemente)Uso de EPI.Descontaminar las superficies.Prevenir la contaminación ambientalConcepto de: laboratorios de Cultivos celulares y citogenética
Un laboratorio de citogenética tiene como objetivo el estudio de especies eucariotas y en especial en los cromosomas humanos. Los laboratorios de cultivo celulares tienen como objetivo la propagación y crecimiento de células eucariotas en condiciones controladas

Laboratorio de citogenética: equipamiento especifico

Para la citogenética: un laboratorio de citogenética tendrá el siguiente equipamiento:Equipo de análisis de imagen.Microscopio óptico convencional y de fluorescencia.